細(xì)胞計(jì)數(shù)是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的重要步驟，為了解細(xì)胞的濃度、數(shù)量和活率等信息，實(shí)驗(yàn)人員常用臺盼藍(lán)染料或AOPI熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色-計(jì)數(shù)。

1、臺盼藍(lán)染色法

臺盼藍(lán)染色是細(xì)胞計(jì)數(shù)中常用的活/死細(xì)胞鑒定染色方法之一。

原理：正常的活細(xì)胞，胞膜結(jié)構(gòu)完整，能夠排斥臺盼藍(lán)，細(xì)胞不被染色；而死細(xì)胞的胞膜不完整，通透性增加，既死細(xì)胞會被染成藍(lán)色，利用臺盼藍(lán)染料的特性便可區(qū)分活/死細(xì)胞。

缺點(diǎn)：

1-臺盼藍(lán)對細(xì)胞有毒害作用，會致死有損傷的細(xì)胞，導(dǎo)致細(xì)胞活性檢測結(jié)果有所偏差；

2-細(xì)胞碎片多、雜質(zhì)多等情況下，無法進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。

適用細(xì)胞種類：培養(yǎng)系細(xì)胞。

2、AOPI染色法

當(dāng)細(xì)胞樣品中的雜質(zhì)過多，明場下無法進(jìn)行準(zhǔn)確計(jì)數(shù)時，我們可以在熒光通道下，用AOPI熒光染料對細(xì)胞進(jìn)行染色。

原理：AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結(jié)合的特性——既活細(xì)胞呈現(xiàn)綠色，死細(xì)胞呈現(xiàn)紅色，利用AOPI染色法，可排除雜質(zhì)對目標(biāo)細(xì)胞的干擾，快速區(qū)分活/死細(xì)胞。

優(yōu)點(diǎn)：可排除紅細(xì)胞、血小板、細(xì)胞碎片等雜質(zhì)對目標(biāo)細(xì)胞的干擾。

缺點(diǎn)：與臺盼藍(lán)試劑相比，成本較高。

適用細(xì)胞種類：免疫細(xì)胞、原代細(xì)胞、血液細(xì)胞等。